WikiSort.ru - Не сортированное

ПОИСК ПО САЙТУ | о проекте
РНК-полимераза II Saccharomyces cerevisiae, включающая все 12 субъединиц[1]
Транскрипция ДНК в РНК, используя фермент РНК полимеразу II

РНК-полимераза II  — фермент эукариот, который катализирует транскрипцию ДНК, синтезирует предшественников мРНК и большинство мяРНК и микроРНК[2][3]. Эта полимераза представляет собой комплекс массой 550 кДа, состоящий из 12 субъединиц. РНК-полимераза II является наиболее изученным типом РНК-полимеразы. Ей необходим широкий спектр транскрипционных факторов для того, чтобы связываться с генами выше промоторов и начинать транскрипцию.

Субъединицы

Ко́ровые субъединицы РНК-полимеразы II были выделены с помощью анализов транскрипции[4]. Выделенный фермент имеет, как правило, 10—12 субъединиц (12 у человека и дрожжей) и не способен к специфическому распознаванию промотора[5]. Многие взаимодействия между её субъединицами уже известны[6].

Компьютерная модель белка RPB1 с раскрашенными субъединицами:
зелёный — домен 1,
синий — домен 2,
песчаный — домен 3,
светло-синий — домен 4,
коричневый — домен 6,
пурпурный — CTD
  • ДНК-зависимая субъединица RPB1 РНК-полимеразы II  — фермент, который в организме человека кодируется геном POLR2A, а в дрожжах кодируется RPO21. RPB1 — самая большая субъединица РНК-полимеразы II. Её С-концевой домен, объединяющий до 52 гептапептидных повторов (YSPTSPS), которые необходимы для полимеразной активности[7]. В сочетании с рядом других субъединиц полимеразы она образует ДНК-связывающий домен полимеразы, в котором матрица ДНК транскрибируется в РНК[8]. Эта субъединица взаимодействует с RPB8[6].
  • RPB2 (POLR2B) — вторая по величине субъединица, которая в комбинации по меньшей мере с двумя другими субъединицами полимеразы образует структуру, которая в активном центре фермента поддерживает контакт между ДНК-матрицей и вновь синтезированной РНК[9].
  • RPB3 (POLR2C) — третья по величине субъединица. Существует в виде гетеродимера с другой полимеразной субъединицей, POLR2J, образующего основной сборочный узел. RPB3 взаимодействует с RPB1-5, 7, 10—12[6].

Субъединица B4 РНК-полимеразы II (RPB4) — кодируется геном POLR2D[10], является четвёртой по величине субъединицей и может играть роль защиты от стресса.

RPB5 у человека кодируется геном POLR2E. Две молекулы этой субъединицы присутствуют в каждой РНК-полимеразе II[11]. RPB5 сильно взаимодействует с RPB1, RPB3 и RPB6[6].

  • RPB6 (POLR2F) образует структуру, по крайней мере, с двумя другими субъединицами, которая стабилизирует транскрипцию полимеразы на матрице ДНК[12].

RPB7 кодируется геном POLR2G и может играть роль в регуляции функций полимеразы[13]. RPB7 взаимодействует с RPB1 и RPB5[6].

  • RPB8 (POLR2H) взаимодействует с субъединицами RPB1-3, 5 и 7[6].
  • RPB9 — паз, в котором матрица ДНК транскрибируется в РНК, состоит из RPB9 (POLR2I) и RPB1.
  • RPB10 — продукт гена POLR2L. Он взаимодействует с RPB1-3 и 5, и сильно с RPB3[6].
  • RPB11 — субъединица RPB11 сама состоит из трёх субъединиц у человека: POLR2J (RPB11-а), POLR2J2 (RPB11-б), и POLR2J3[14] (RPB11-с).
  • RPB12 взаимодействует с RPB3 (POLR2K)[6].

Сборка

В сборке РНК-полимеразы II участвует RPB3[15]. Субкомплекс RPB2 и RPB3 появляется вскоре после синтеза субъединицы[15]. Этот комплекс впоследствии взаимодействует с RPB1[15]. RPB3, RPB5 и RPB7 взаимодействуют друг с другом, чтобы сформировать гомодимеры, а RPB3 и RPB5 вместе способны связаться со всеми другими субъединицами RPB, за исключением RPB9.[6] Только RPB1 сильно связывается с RPB5[6]. Субъединицы RPB1 также контактирует с RPB7, RPB10, хотя и более слабо, чем с RPB8, контактирование с которой у неё наиболее эффективно[6]. После в комплекс RPB1 входят и другие субъединицы, такие как RPB5 и RPB7 могут входить, где RPB5 связывается с RPB6 и RPB8 и RPB3 доставляет RPB10, RPB 11, и RPB12.[6] RPB4 и RPB9 могут соединятся только когда почти весь комплекс собран. RPB4 образует комплекс с RPB7[6].

Кинетика

Фермент может катализировать до нескольких миллионов реакций в секунду. Скорость работы фермента зависит от состава раствора и концентрации субстрата. Как и другие ферменты, POLR2 имеет кривую насыщения и максимальную скорость (Vmax). Он имеет Km (концентрация субстрата, необходимого для достижения половины Vmax) и kcat (число молекул субстрата, обрабатываемых одним активным центром в секунду). Указанная константа даёт kcat/Km. Теоретический максимум для указанной константы находится в пределах от 108 до 109 (M−1 с−1), когда каждое столкновение фермента с его субстратом приводит к акту катализа. У дрожжей мутация в домене Trigger-Loop самой большой субъединицы может изменить кинетику фермента[16].

Число оборотов для РНК-полимеразы II составляет 0,16 с−1 от концентрации[17]. Бактериальная РНК-полимераза, родственник РНК-полимеразы II, переключается между инактивированным и активированным состояниями транслокацией назад и вперед вдоль ДНК[18]. Концентрации [NTP]eq = 10 μM ГТФ, 10 μМ УТФ, 5 μМ АТФ и 2,5 μМ ЦТФ, производят средний рейтинг удлинения, число оборотов, ~1 пара оснований (NTP)−1 для бактериальной РНК-полимеразы[18].

РНК-полимераза II ингибируется α-аманитином[19].

Голоэнзим

Голоэнзим РНК-полимеразы II — форма эукариотической РНК-полимеразы II, которая набирается в живых клетках в промоторах генов белков[5]. Он состоит из РНК-полимеразы II, подмножества общих факторов транскрипции, и регуляторных белков, известных как белки SRB.

Часть сборки голоэнзима именуется как преиниационный комплекс[en], потому что его сборка происходит на месте промотора гена до иннициации транскрипции. Посреднический комплекс[en] выступает в качестве моста между РНК-полимеразой II и факторами транскрипции.

Управление структурой хроматина

Это[что?] краткое изложение механизма на примере дрожжевых клеток, с помощью которых структуры хроматина и посттрансляционная модификация гистонов помогают регулировать транскрипцию генов РНК-полимеразой II.

Этот[какой?] путь даёт примеры регулирования в следующих точках транскрипции:

  • Преинициация (продвижение по Bre1, модификация гистонов).
  • Инициация (продвижение по TFIIH, модификация Pol II и продвижение COMPASS, модификация гистонов).
  • Удлинение (продвижение по Set2, модификации гистонов).

Обратите внимание, что это[что?] относится к различным этапам этого[какого?] процесса в качестве регуляторных шагов. Это[что?] не было доказано, что они[кто?] используются для регулирования, но очень вероятно, что это[что?] так.

Удлинение промоторов РНК Pol II могут быть суммированы в 3 классах:

  1. Медикамент/зависящих от последовательности (задержка/аффект) факторов (различные мешающие белки).
  2. Структуры хроматина, ориентированные на факторы (посттранскрипционные модификаторы гистонов, например, гистонов метилтрансферазы).
  3. РНК Pol II-факторы, улучшающие качество транскрипции (различные мешающие белки и кофакторы Pol II).

Участвующие белковые комплексы

Факторы, ориентированные на структуры хроматина:
((HMTs (гистон-метилтрансферазы)):
COMPASS§† — (комплекс белков, связанных с Set1) — Метилатлизин 4 гистона H3.
Set2 — Метилатлизин 36 гистона H3.
(интересный не имеющий значения пример: Dot1*‡ — метилирует лизин 79 гистона H3.)

(Другие): Bre1 — убиквинизирует (добавляет убиквитин) на лизин 123 гистона H2B. Связан с предварительной инициацией и позволяет связывание РНК Pol II.

CTD РНК полимеразы

С-конец RPB1 добавляется для формирования С-концевого домена (CTD). Карбоксильно-концевой домен РНК-полимеразы II, как правило, содержит до 52 повторов последовательности Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser.[20] Другие белки часто связывается с С-концевым доменом РНК-полимеразы с целью активировать полимеразную активность. Это домен белка, который участвует в инициации транскрипции, кэпировании РНК-транскрипта, и прикреплении к сплайсосоме для сплайсинга РНК.[7]

Примечания

  1. ↑ Meyer P. A., Ye P., Zhang M., Suh M.-H., Fu J. (Jun 2006). “Phasing RNA polymerase II using intrinsically bound Zn atoms: an updated structural model”. Structure. 14 (6): 973—82. DOI:10.1016/j.str.2006.04.003. PMID 16765890.
  2. ↑ Kornberg R. (1999). “Eukaryotic transcriptional control”. Trends in Cell Biology. 9 (12): M46. DOI:10.1016/S0962-8924(99)01679-7. PMID 10611681.
  3. ↑ Sims R. J. 3rd, Mandal S. S., Reinberg D. Recent highlights of RNA-polymerase-II-mediated transcription. (англ.) // Current opinion in cell biology. — 2004. — Vol. 16, no. 3. — P. 263—271. — DOI:10.1016/j.ceb.2004.04.004. — PMID 15145350. [исправить]
  4. ↑ Sawadogo M., Sentenac A. (1990). “RNA polymerase B (II) and general transcription factors”. Annu. Rev. Biochem. 59: 711—54. DOI:10.1146/annurev.bi.59.070190.003431. PMID 2197989.
  5. 1 2 Myer V. E., Young R. A. (October 1998). “RNA polymerase II holoenzymes and subcomplexes” (PDF). J. Biol. Chem. 273 (43): 27757—60. DOI:10.1074/jbc.273.43.27757. PMID 9774381.
  6. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Acker J., de Graaff M., Cheynel I., Khazak V., Kedinger C., Vigneron M. (Jul 1997). “Interactions between the human RNA polymerase II subunits”. J. Biol. Chem. 272 (27): 16815—21. DOI:10.1074/jbc.272.27.16815. PMID 9201987.
  7. 1 2 Brickey W. J., Greenleaf A. L. (June 1995). “Functional studies of the carboxy-terminal repeat domain of Drosophila RNA polymerase II in vivo”. Genetics. 140 (2): 599—613. PMC 1206638. PMID 7498740.
  8. ↑ Entrez Gene: POLR2A polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide A, 220kDa.
  9. ↑ Entrez Gene: POLR2B polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide B, 140 kDa.
  10. ↑ Khazak V., Estojak J., Cho H., Majors J., Sonoda G., Testa J. R., Golemis E. A. (May 1998). “Analysis of the interaction of the novel RNA polymerase II (pol II) subunit hsRPB4 with its partner hsRPB7 and with pol II”. Mol. Cell. Biol. 18 (4): 1935—45. PMC 121423. PMID 9528765.
  11. ↑ Entrez Gene: POLR2E polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide E, 25 kDa.
  12. ↑ Entrez Gene: POLR2F polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide F.
  13. ↑ Entrez Gene: POLR2G polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide G.
  14. ↑ POLR2J3 polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide J3.
  15. 1 2 3 Kolodziej P. A., Young R. A. (Sep 1991). “Mutations in the three largest subunits of yeast RNA polymerase II that affect enzyme assembly”. Mol. Cell. Biol. 11 (9): 4669—78. PMC 361357. PMID 1715023.
  16. ↑ Kaplan, Craig (April 12, 2012). “Dissection of Pol II Trigger Loop Function and Pol II Activity–Dependent Control of Start Site Selection In Vivo”. PLoS Genetics.
  17. ↑ Jin J., Dong W., Guarino L. A. (Dec 1998). “The LEF-4 subunit of Baculovirus RNA polymerase has RNA 5'-triphosphatase and ATPase activities”. J. Virol. 72 (12): 10011—9. PMC 110520. PMID 9811739.
  18. 1 2 Abbondanzieri E. A., Greenleaf W. J., Shaevitz J. W., Landick R., Block S. M. (Nov 2005). “Direct observation of base-pair stepping by RNA polymerase”. Nature. 438 (7067): 460—5. DOI:10.1038/nature04268. PMC 1356566. PMID 16284617.
  19. ↑ Kaplan, Craig D. (Jun 6, 2008). “The RNA Polymerase II Trigger Loop Functions in Substrate Selection and is Directly Targeted by α-amanitin”. Mol. Cell. PMC 2475549.
  20. ↑ Meinhart A., Cramer P. (July 2004). “Recognition of RNA polymerase II carboxy-terminal domain by 3'-RNA-processing factors”. Nature. 430 (6996): 223—6. DOI:10.1038/nature02679. PMID 15241417.

Данная страница на сайте WikiSort.ru содержит текст со страницы сайта "Википедия".

Если Вы хотите её отредактировать, то можете сделать это на странице редактирования в Википедии.

Если сделанные Вами правки не будут кем-нибудь удалены, то через несколько дней они появятся на сайте WikiSort.ru .



Текст в блоке "Читать" взят с сайта "Википедия" и доступен по лицензии Creative Commons Attribution-ShareAlike; в отдельных случаях могут действовать дополнительные условия.

Другой контент может иметь иную лицензию. Перед использованием материалов сайта WikiSort.ru внимательно изучите правила лицензирования конкретных элементов наполнения сайта.

2019-2024
WikiSort.ru - проект по пересортировке и дополнению контента Википедии