WikiSort.ru - Не сортированное

ПОИСК ПО САЙТУ | о проекте
Гистидин киназа-, ДНК-гираза B-, и АТФ-Hsp90

Твёрдая ленточная модель дрожжевого Hsp90-димера (α-спирали = красный, β-листы = голубой, петли = серый) в комплексе с АТФ (красная палочка).[1]
Идентификаторы
Символ HATPase_c
Pfam PF02518
Pfam clan CL0025
InterPro IPR003594
SMART SM00387
SCOP 1ei1
SUPERFAMILY 1ei1
Доступные структуры белков
Pfam структуры
PDB RCSB PDB; PDBe; PDBj
PDBsum 3D-модель
белок Hsp90

Структура N-концевого домена шаперона дрожжей Hsp90.[2]
Идентификаторы
Символ Hsp90
Pfam PF00183
InterPro IPR020576
PROSITE PDOC00270
SCOP 1ah6
SUPERFAMILY 1ah6
Доступные структуры белков
Pfam структуры
PDB RCSB PDB; PDBe; PDBj
PDBsum 3D-модель

Hsp90 (сокр. от англ. Heat shock protein 90), также белок теплового шока 90 — это белок-шаперон, который помогает другим белкам правильно складываться (участвует в фолдинге), стабилизирует белки от теплового стресса и способствует деградации белка. Он также стабилизирует ряд белков, необходимых для роста опухоли, поэтому ингибиторы Hsp90 исследуются как противораковые лекарственные средства.

Белки теплового шока, как класс, относятся к числу наиболее экспрессивных клеточных белков всех видов[3]. Как следует из их названия, белки теплового шока защищают клетки, когда они подвергаются воздействию повышенных температур. На них приходится 1-2% от общего содержания белка, в не подверженных стрессу клетках. Однако, когда клетки нагреваются, доля белков теплового шока увеличивается до 4-6% от общего содержания клеточных белков[4].

Белок теплового шока 90 (Hsp90) является одним из наиболее распространенных теплосодержащих белков. Название «90» происходит от того, что его молекулярная масса составляет около 90 килодальтон. Белок, имеющий массу 90 кДа считается довольно крупным для нефиброзных белков. Hsp90 встречается у бактерий и всех ветвей эукариот, но, по-видимому, отсутствует в археях[5]. В то время как цитоплазматический Hsp90 необходим для жизнеспособности при всех условиях у эукариот, бактериальный гомолог HtpG может применяться в условиях нетеплового стресса[6].

Изоформы

Hsp90 является высококонсервативным и экспрессируется во множестве различных организмов от бактерий до млекопитающих, включая прокариотический аналог HtpG (высокотемпературный белок G) с 40% идентичностью последовательностей и 55% сходством с белком человека[5]. Hsp90 дрожжей на 60% идентичны Hsp90α человека.

В клетках млекопитающих существуют два или более гена, кодирующих цитозольные гомологи Hsp90[5], с человеческим Hsp90α, имеющим 85% идентичность последовательности с Hsp90β[7]. Предполагается, что α- и β-формы являются результатом события дублирования генов, произошедшего миллионы лет назад[5].

Пять функциональных человеческих генов, кодирующих изоформы белков Hsp90, представлены в виде таблице[7]:

семейство внутриклеточная локализация подсемейство ген семейство
HSP90A цитоплазматический HSP90AA
(индуцируемый)		 HSP90AA1 Hsp90-α1
HSP90AA2 Hsp90-α2
HSP90AB
(конститутивно экспрессируемый)		 HSP90AB1 Hsp90-β
HSP90B эндоплазматический ретикулум HSP90B1 Эндоплазмин/
GRP-94
TRAP митохондриальный TRAP1 белок, ассоциированный с TNF1

Существует 12 человеческих псевдогенов (нефункциональных генов), которые кодируют дополнительные изоформы Hsp90, они не экспрессируются в виде белков.

Недавно был идентифицирован связанный с мембраной цитозольный вариант Hsp90, у которого отсутствовал сайт связывания АТФ, и был назван Hsp90N[8]. Этот транскрипт HSP90α-Δ-N представляет собой химеру с первой 105 п.н. кодирующей последовательности, полученной из гена CD47 на хромосоме 3q13.2, и оставшуюся кодирующую последовательность, полученную из HSP90AA1[7]. Однако позже было установлено, что ген, кодирующий Hsp90N не существует в геноме человека. Это, возможно, артефакт клонирования или продукт хромосомной перегруппировки, происходящий в одной клеточной линии[9].

Структура

Общая структура

Общая структура Hsp90 аналогична общей структуре других белков, поскольку она содержит все общие вторичные структурные элементы (например, альфа-спирали, бета-листы и случайные клубки). Будучи цитоплазматическим белком, Hsp90 является глобулярным по структуре, который в основном состоит из остатков неполярных аминокислот внутри и полярных снаружи, данное свойство позволяет взаимодействовать с водой. Hsp90 содержит девять спиралей и восемь антипараллельных бета-листов, которые объединяются, формируя несколько альфа/бета сэндвичных структур. 310 спиралей составляют примерно 11% аминокислотных остатков белка, что намного выше, в среднем на 4%, чем в других белках.

Доменная структура

Hsp90 состоит из четырёх структурных доменов[10][11][12]:

  • высококонсервативный N-концевой домен (NTD) ~ 25 кДа
  • область так называемого «заряженного линкера», которая соединяет N-конец со средним доменом
  • средний домен (MD) ~ 40 кДа
  • С-концевой домен (CTD) ~ 12 кДа.

Кристаллические структуры доступны для N-концевого домена дрожжей и Hsp90 человека[13][14][15], для комплексов N-конца с ингибиторами и нуклеотидами и для среднего домена дрожжей Hsp90[13][14][16]. Недавно были выяснены полные длины структур белков Hsp90 из E. coli (2IOP, 2IOQ)[17], дрожжей (2CG9, 2CGE)[18], и эндоплазматического ретикулума собаки (2O1U, 2O1V)[19][20].

Hsp90 образует гомодимеры, где локальные контакты расположены внутри С-конца при открытой конформации димера. N-концы также контактируют в замкнутой конформации димера[16].

N-терминальный домен

N-терминальный домен имеет гомологию не только среди членов семейства шаперонов Hsp90, но также и среди членов суперсемейства АТФазы/GHKL киназы (сокр. от Gyrase, Hsp90, Histidine Kinase, MutL)[11].

Обычный связывающий карман для АТФ и ингибитора гелданамицина расположен в N-концевом домене. Аминокислоты, которые непосредственно участвуют в взаимодействии с АТФ, являются Leu34, Asn37, Asp79, Asn92, Lys98, Gly121 и Phe124. Кроме того, ионы Mg2+ и несколько молекул воды образуют мостиковые взаимодействия, посредством электростатического и водородного связывания, соответственно, между молекулами Hsp90 и AТФ. Кроме того, остаток Glu33 необходим для гидролиза АТФ.

Средний домен

Средний домен разделен на три области:

  • 3-слойный α-β-α сэндвич
  • 3-оборотная α-спираль и нерегулярные петли
  • 6-оборотная α-спираль.

Средний домен (MD) также участвует в связывании с белком клиента. Например, белки, которые, как известно, взаимодействуют с данным MD Hsp90, включают PKB/Akt1, eNOS[21][22], Aha1, Hch1. Кроме того, известно, что связывание субстрата (например, Aha1 и Hch1) с MD также увеличивает активность АТФазы Hsp90[16][23].

C-терминальный домен

С-концевой домен обладает альтернативным сайтом связывания АТФ, который становится доступным, когда занят карман Бержерата N-конца белка[24][25].

На С-терминальном конце белка расположен сайт распознавания мотивов тетратрипептидного повтора (TPR), консервативный пентапептид MEEVD, который отвечает за взаимодействие с кофакторами, такими как иммунофилины FKBP51 и FKBP52, индуцированный стрессом фосфопротеин 1 (Sti1/Hop), циклофилин-40, PP5, Tom70 и многие другие[26].

Выполняемые функции

В нормальных клетках

В клетках, не подверженных стрессу Hsp90 играет ряд важных ролей, которые включают в себя помощь в фолдинге, внутриклеточном переносе, поддержании и деградации белков, а также в облегчении клеточной сигнализации.

Фолдинг белка и роль шаперона

Известно, что Hsp90 ассоциируется с ненативными структурами многих белков, это привело к предложению, что Hsp90 участвует в фолдинге белка вообще. Было показано, что Hsp90 подавляет агрегацию широкого спектра «клиентских» или «субстратных» белков и, следовательно, действует как общий защитный шаперон. Однако Hsp90 несколько более селективный (избирательный), чем другие шапероны.

Деградация белков

Эукариотические белки, которые больше не нужны или неправильно свернуты или повреждены иным образом, обычно маркируются для деструкции (разрушения) путём полиубиквитинированием. Эти убиквитиновые белки распознаются и деструктурируются с помощью 26S протеасом. Следовательно, 26S-протеасомы являются неотъемлемой частью механизма клетки деградации белков. Кроме того, для поддержания третичной структуры протеасомы необходим постоянный источник функционального Hsp90. Наконец, эксперименты с теплочувствительными мутантами Hsp90 и протеасомами 26S предполагают, что Hsp90 ответственен за большинство, если не все, активности АТФазы протеасом.

Взаимодействие со стероидными рецепторами

Схематическая диаграмма транслокации (перемещения) глюкокортикоидного рецептора (GR) из цитоплазмы в клеточное ядро ​​с помощью Hsp90 (90)[27]. В цитоплазме GR комплексно связан с Hsp90 и иммунофилином FKBP51 (51). Связывание гормона с GR вызывает конформационное изменение в комплексе, что приводит к обмену FKBP51 на FKBP52 (52). FKBP52 в свою очередь связывает динеин (dyn) — моторный белок, который прикрепляется к цитоскелету и переносит комплекс GR в ядро. Один раз в клеточном ядре комплекс диссоциирует на GR, который димеризуется и связывается с молекулой ДНК, где далее происходит облегчённая транскрипция ДНК в мРНК.

Глюкокортикоидный рецептор (GR) является наиболее тщательно изученным примером стероидного рецептора, функция которого в решающей степени зависит от взаимодействия с Hsp90[28][29]. В отсутствие кортизола — стероидного гормона, GR находится в цитозоле, в образованном комплексом с несколькими белками-шаперонами, включая Hsp90 (см. Рисунок справа). Эти шапероны поддерживают ГР в состоянии, способном связывать гормон. Вторая роль Hsp90 заключается в связывании иммунофилинов (например, FKBP52), которые присоединяют комплекс GR к пути распространения белка динеина, который транслоцирует (переносит) активированный рецептор из цитоплазмы в клеточное ядро[30]. Один раз в ядре GR димеризуется и связывается с определёнными последовательностями ДНК и тем самым усиливает экспрессию GR-чувствительных генов. Hsp90 также необходим для правильного функционирования ряда других стероидных рецепторов, в том числе ответственных за связывание альдостерона[31], андрогена[32], эстрогена[33] и прогестерона[34].

Опухолевые клетки

Злокачественные клетки сверхэкспрессируют ряд белков, включая рецепторы фактора роста, такие как EGFR или белки трансдукции сигнала, такие как PI3K и AKT (ингибирование данных белков может вызвать апоптоз). Hsp90 стабилизирует различные рецепторы фактора роста и некоторые сигнальные молекулы, включая PI3K и AKT-белки. Следовательно, ингибирование Hsp90 может индуцировать апоптоз посредством ингибирования сигнального пути PI3K/AKT и сигналов фактора роста в целом.

Ещё одна важная роль Hsp90 в канцерогенезе — стабилизация мутантных белков, таких как v-Src, слияния онкогенов Bcr/Abl и мутантных форм p53, которые появляются при трансформации клеток.

Кроме того, Hsp90 участвует во многих ключевых процессах онкогенеза, таких как самодостаточность сигналов роста, стабилизация мутантных белков, ангиогенез и метастазирование.

Клиническое значение

Примечания

  1. ↑ PDB 2CG9; Ali MM, Roe SM, Vaughan CK, Meyer P, Panaretou B, Piper PW, Prodromou C, Pearl LH (April 2006). “Crystal structure of an Hsp90-nucleotide-p23/Sba1 closed chaperone complex”. Nature. 440 (7087): 1013—7. DOI:10.1038/nature04716. PMID 16625188.
  2. ↑ Prodromou C, Roe SM, Piper PW, Pearl LH (June 1997). “A molecular clamp in the crystal structure of the N-terminal domain of the yeast Hsp90 chaperone”. Nat. Struct. Biol. 4 (6): 477—82. DOI:10.1038/nsb0697-477. PMID 9187656.
  3. ↑ Csermely P, Schnaider T, Soti C, Prohászka Z, Nardai G (August 1998). “The 90-kDa molecular chaperone family: structure, function, and clinical applications. A comprehensive review”. Pharmacol. Ther. 79 (2): 129—68. DOI:10.1016/S0163-7258(98)00013-8. PMID 9749880.
  4. ↑ Crevel G, Bates H, Huikeshoven H, Cotterill S (1 June 2001). “The Drosophila Dpit47 protein is a nuclear Hsp90 co-chaperone that interacts with DNA polymerase alpha”. J. Cell. Sci. 114 (Pt 11): 2015—25. PMID 11493638.
  5. 1 2 3 4 Chen B, Zhong D, Monteiro A (2006). “Comparative genomics and evolution of the HSP90 family of genes across all kingdoms of organisms”. BMC Genomics. 7: 156. DOI:10.1186/1471-2164-7-156. PMC 1525184. PMID 16780600.
  6. ↑ Thomas JG, Baneyx F (October 1998). “Roles of the Escherichia coli Small Heat Shock Proteins IbpA and IbpB in Thermal Stress Management: Comparison with ClpA, ClpB, and HtpG In Vivo”. J. Bacteriol. 180 (19): 5165—72. PMC 107554. PMID 9748451.
  7. 1 2 3 Chen B, Piel WH, Gui L, Bruford E, Monteiro A (December 2005). “The HSP90 family of genes in the human genome: insights into their divergence and evolution”. Genomics. 86 (6): 627—37. DOI:10.1016/j.ygeno.2005.08.012. PMID 16269234.
  8. ↑ Grammatikakis N, Vultur A, Ramana CV, Siganou A, Schweinfest CW, Watson DK, Raptis L (March 2002). “The role of Hsp90N, a new member of the Hsp90 family, in signal transduction and neoplastic transformation”. J. Biol. Chem. 277 (10): 8312—20. DOI:10.1074/jbc.M109200200. PMID 11751906.
  9. ↑ Zurawska A, Urbanski J, Bieganowski P (November 2008). “Hsp90n - An accidental product of a fortuitous chromosomal translocation rather than a regular Hsp90 family member of human proteome”. Biochimica et Biophysica Acta. 1784 (11): 1844—6. DOI:10.1016/j.bbapap.2008.06.013. PMID 18638579.
  10. ↑ Pearl LH, Prodromou C (February 2000). “Structure and in vivo function of Hsp90”. Curr. Opin. Struct. Biol. 10 (1): 46—51. DOI:10.1016/S0959-440X(99)00047-0. PMID 10679459.
  11. 1 2 Prodromou C, Pearl LH (October 2003). “Structure and functional relationships of Hsp90”. Curr Cancer Drug Targets. 3 (5): 301—23. DOI:10.2174/1568009033481877. PMID 14529383.
  12. ↑ Pearl LH, Prodromou C (2001). “Structure, function, and mechanism of the Hsp90 molecular chaperone”. Adv. Protein Chem. Advances in Protein Chemistry. 59: 157—86. DOI:10.1016/S0065-3233(01)59005-1. ISBN 978-0-12-034259-4. PMID 11868271.
  13. 1 2 Stebbins CE, Russo AA, Schneider C, Rosen N, Hartl FU, Pavletich NP (April 1997). “Crystal structure of an Hsp90-geldanamycin complex: targeting of a protein chaperone by an antitumor agent”. Cell. 89 (2): 239—50. DOI:10.1016/S0092-8674(00)80203-2. PMID 9108479.
  14. 1 2 Prodromou C, Roe SM, O'Brien R, Ladbury JE, Piper PW, Pearl LH (July 1997). “Identification and structural characterization of the ATP/ADP-binding site in the Hsp90 molecular chaperone”. Cell. 90 (1): 65—75. DOI:10.1016/S0092-8674(00)80314-1. PMID 9230303.
  15. ↑ Prodromou C, Roe SM, Piper PW, Pearl LH (June 1997). “A molecular clamp in the crystal structure of the N-terminal domain of the yeast Hsp90 chaperone”. Nat. Struct. Biol. 4 (6): 477—82. DOI:10.1038/nsb0697-477. PMID 9187656.
  16. 1 2 3 Meyer P, Prodromou C, Hu B, Vaughan C, Roe SM, Panaretou B, Piper PW, Pearl LH (March 2003). “Structural and functional analysis of the middle segment of hsp90: implications for ATP hydrolysis and client protein and cochaperone interactions”. Mol. Cell. 11 (3): 647—58. DOI:10.1016/S1097-2765(03)00065-0. PMID 12667448.
  17. ↑ Shiau AK, Harris SF, Southworth DR, Agard DA (October 2006). “Structural Analysis of E. coli hsp90 reveals dramatic nucleotide-dependent conformational rearrangements”. Cell. 127 (2): 329—40. DOI:10.1016/j.cell.2006.09.027. PMID 17055434.
  18. ↑ Ali MM, Roe SM, Vaughan CK, Meyer P, Panaretou B, Piper PW, Prodromou C, Pearl LH (April 2006). “Crystal structure of an Hsp90-nucleotide-p23/Sba1 closed chaperone complex”. Nature. 440 (7087): 1013—7. DOI:10.1038/nature04716. PMID 16625188.
  19. ↑ Dollins DE, Warren JJ, Immormino RM, Gewirth DT (October 2007). “Structures of GRP94-nucleotide complexes reveal mechanistic differences between the hsp90 chaperones”. Mol. Cell. 28 (1): 41—56. DOI:10.1016/j.molcel.2007.08.024. PMC 2094010. PMID 17936703.
  20. ↑ Wandinger SK, Richter K, Buchner J (July 2008). “The hsp90 chaperone machinery”. J. Biol. Chem. 283 (27): 18473—7. DOI:10.1074/jbc.R800007200. PMID 18442971.
  21. ↑
  22. ↑ Fontana J, Fulton D, Chen Y, Fairchild TA, McCabe TJ, Fujita N, Tsuruo T, Sessa WC (May 2002). “Domain mapping studies reveal that the M domain of hsp90 serves as a molecular scaffold to regulate Akt-dependent phosphorylation of endothelial nitric oxide synthase and NO release”. Circ. Res. 90 (8): 866—73. DOI:10.1161/01.RES.0000016837.26733.BE. PMID 11988487.
  23. ↑ Panaretou B, Siligardi G, Meyer P, Maloney A, Sullivan JK, Singh S, Millson SH, Clarke PA, Naaby-Hansen S, Stein R, Cramer R, Mollapour M, Workman P, Piper PW, Pearl LH, Prodromou C (December 2002). “Activation of the ATPase activity of hsp90 by the stress-regulated cochaperone aha1”. Mol. Cell. 10 (6): 1307—18. DOI:10.1016/S1097-2765(02)00785-2. PMID 12504007.
  24. ↑ Marcu MG, Chadli A, Bouhouche I, Catelli M, Neckers LM (November 2000). “The heat shock protein 90 antagonist novobiocin interacts with a previously unrecognized ATP-binding domain in the carboxyl terminus of the chaperone”. J. Biol. Chem. 275 (47): 37181—6. DOI:10.1074/jbc.M003701200. PMID 10945979.
  25. ↑ Söti C, Rácz A, Csermely P (March 2002). “A Nucleotide-dependent molecular switch controls ATP binding at the C-terminal domain of Hsp90. N-terminal nucleotide binding unmasks a C-terminal binding pocket”. J. Biol. Chem. 277 (9): 7066—75. DOI:10.1074/jbc.M105568200. PMID 11751878.
  26. ↑ Young JC, Obermann WM, Hartl FU (July 1998). “Specific binding of tetratricopeptide repeat proteins to the C-terminal 12-kDa domain of hsp90”. J. Biol. Chem. 273 (29): 18007—10. DOI:10.1074/jbc.273.29.18007. PMID 9660753.
  27. ↑ Davies TH, Ning YM, Sánchez ER (February 2002). “A new first step in activation of steroid receptors: hormone-induced switching of FKBP51 and FKBP52 immunophilins”. J. Biol. Chem. 277 (7): 4597—600. DOI:10.1074/jbc.C100531200. PMID 11751894.
  28. ↑ Pratt WB, Morishima Y, Murphy M, Harrell M (2006). “Chaperoning of glucocorticoid receptors”. Handb Exp Pharmacol. Handbook of Experimental Pharmacology. 172 (172): 111—38. DOI:10.1007/3-540-29717-0_5. ISBN 3-540-25875-2. PMID 16610357.
  29. ↑ Grad I, Picard D (September 2007). “The glucocorticoid responses are shaped by molecular chaperones”. Mol. Cell. Endocrinol. 275 (1—2): 2—12. DOI:10.1016/j.mce.2007.05.018. PMID 17628337.
  30. ↑ Pratt WB, Galigniana MD, Morishima Y, Murphy PJ (2004). “Role of molecular chaperones in steroid receptor action”. Essays Biochem. 40: 41—58. PMID 15242338. Архивировано из оригинала 2007-08-18. Проверено 2017-09-17.
  31. ↑ Rafestin-Oblin ME, Couette B, Radanyi C, Lombes M, Baulieu EE (June 1989). “Mineralocorticosteroid receptor of the chick intestine. Oligomeric structure and transformation”. J. Biol. Chem. 264 (16): 9304—9. PMID 2542305.
  32. ↑ Joab I, Radanyi C, Renoir M, Buchou T, Catelli MG, Binart N, Mester J, Baulieu EE (1984). “Common non-hormone binding component in non-transformed chick oviduct receptors of four steroid hormones”. Nature. 308 (5962): 850—3. DOI:10.1038/308850a0. PMID 6201744.
  33. ↑ Redeuilh G, Moncharmont B, Secco C, Baulieu EE (May 1987). “Subunit composition of the molybdate-stabilized "8-9 S" nontransformed estradiol receptor purified from calf uterus”. J. Biol. Chem. 262 (15): 6969—75. PMID 3584104.
  34. ↑ Catelli MG, Binart N, Jung-Testas I, Renoir JM, Baulieu EE, Feramisco JR, Welch WJ (December 1985). “The common 90-kd protein component of non-transformed '8S' steroid receptors is a heat-shock protein”. EMBO J. 4 (12): 3131—5. PMC 554632. PMID 2419124.

Данная страница на сайте WikiSort.ru содержит текст со страницы сайта "Википедия".

Если Вы хотите её отредактировать, то можете сделать это на странице редактирования в Википедии.

Если сделанные Вами правки не будут кем-нибудь удалены, то через несколько дней они появятся на сайте WikiSort.ru .



Текст в блоке "Читать" взят с сайта "Википедия" и доступен по лицензии Creative Commons Attribution-ShareAlike; в отдельных случаях могут действовать дополнительные условия.

Другой контент может иметь иную лицензию. Перед использованием материалов сайта WikiSort.ru внимательно изучите правила лицензирования конкретных элементов наполнения сайта.

2019-2025
WikiSort.ru - проект по пересортировке и дополнению контента Википедии