| 5-бромо-4-хлоро-3-индоил-бета-D-галактопиранозид | |
|---|---|
 | |
| Общие | |
| Систематическое наименование |
5-бромо-4-хлоро-3-индоил-бета-D-галактопиранозид |
| Хим. формула | C14H15BrClNO6 |
| Физические свойства | |
| Молярная масса | 408,629 г/моль |
| Классификация | |
| Рег. номер CAS | 7240-90-6 |
| PubChem | 65181 |
| Рег. номер EINECS | 230-640-8 |
| SMILES | |
| InChI | |
| ChEBI | 75055 |
| ChemSpider | 58680 |
| Приводятся данные для стандартных условий (25 °C, 100 кПа), если не указано иного. | |
X-gal (также BCIG от англ. bromo-chloro-indolyl-galactopyranoside) — органическое соединение, состоящее из галактозы, соединенной с индолом. Очень широко используется в качестве субстрата для бета-галактозидаз в генетической инженерии и молекулярной биологии.
Применение
Клонирование
X-gal используют при клонировании генов для определения экспрессии в клетке гена фермента β-галактозидазы, закодированного в гене lacZ.
X-gal расщепляется β-галактозидазами, при этом образуется галактоза и 5-бромо-4-хлоро-3-гидроксииндол. Последний окисляется в 5,5'-дибромо-4,4'-дихлоро-индиго, нерастворимый окрашенный продукт. В чашку Петри или культуральный флакон вносят X-gal совместно с индуктором β-галактозидаз, например, IPTG.
X-gal позволяет визуально определить, какие из колоний E. coli трансформированы нужным вектором. В норме в клетках E. coli фермент, закодированный геном lacZ синтезируется под действием индуктора IPTG, а синее окрашивание теряется у клеток, содержащих генно-инженерную конструкцию, в которой ген lacZ нарушен в результате генетической вставки.
Репортер
Ген lacZ может быть использован в качестве репортерного, при выращивания бактерии или дрожжей на среде, содержащей X-gal. В случае, когда промотор гена-мишени связан с кодирующей частью гена галактозидазы, связывание белка-активатора с промотором, приводит к образованию окрашенного продукта расщепления X-gal.[1]
Исследование воды
X-Gal используют для определения E. coli и родственных бактерий в образцах воды.
Примечания
- ↑ Joung J, Ramm E, Pabo C (2000). “A bacterial two-hybrid selection system for studying protein-DNA and protein-protein interactions”. Proc Natl Acad Sci USA. 97 (13): 7382—7. DOI:10.1073/pnas.110149297. PMC 16554. PMID 10852947.
 |
Это заготовка статьи по молекулярной биологии. Вы можете помочь проекту, дополнив её. |
Данная страница на сайте WikiSort.ru содержит текст со страницы сайта "Википедия".
Если Вы хотите её отредактировать, то можете сделать это на странице редактирования в Википедии.
Если сделанные Вами правки не будут кем-нибудь удалены, то через несколько дней они появятся на сайте WikiSort.ru .